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細胞支原體污染PCR檢測試劑盒

更新時間:2014-07-08點擊次數(shù):1880

細胞支原體污染PCR檢測試劑盒

產(chǎn)地:美國Southern Biotech Associates,Inc. SBA

產(chǎn)品信息:

中文名稱

英文名稱

貨號

規(guī)格

支原體PCR檢測試劑盒

Mycoplasma Detection Kit

13100-01

50T

產(chǎn)品特點:

  • 用于特異性檢測細胞培養(yǎng)液中支原體的污染
  • 用于擴增支原體基因組中16S rRNA編碼區(qū)
  • 特殊的引物設計擴增用于覆蓋支原體的三大類(Mycoplasma,Acholeplasma and Ureaplasma,因此可檢測超過95%的潛在的細胞污染。
  • 檢測方法簡單,3小時內(nèi)出結(jié)果。
  • 檢測靈敏度高:可檢測到100ul細胞上清液中2-5毫微微克的支原體DNA。
  • 特異性高,只擴增細胞培養(yǎng)液中支原體DNA,而真核細胞和細菌的DNA被擴增。
  • 試劑盒帶有陽性對照用于驗證PCR體系的穩(wěn)定性。
  • 試劑盒內(nèi)帶有內(nèi)參對照,用于排除PCR抑制劑引起的假陰性。

 

試劑盒用于擴增的支原體種屬及對應PCR產(chǎn)物對照片段

支原體種屬

PCR產(chǎn)物片段(bp)

A.laidlawii

611

M.arginini

448

M.arthritidis

486

M.bovis

605

M.cloacale

459

M.falconis

458

M.faucium

479

M.fermentans

579

M.genitalium

464

M.hominis

448

M.hyorhinis

525

M.hyosynoviae

471

M.opalescents

573

M.orale

503

M.pirum

533

M.pneumonia

493

M.salivarium

482

M.synoviae

572

U.urealyticum

558

結(jié)果分析:

  • 細胞如被支原體污染,可擴增到448-611bp一條或多個條帶
  • 樣本中包含內(nèi)參的DNA將會擴增出270bpPCR片段(見圖,泳道7),該擴增表明實驗系統(tǒng)可靠性。
  • 如在一些樣品中擴增不到內(nèi)參(270bp),這種情況下可設置陰性對照(樣本為水),可擴增到270bp的條帶。
  • 如果樣品中含有PCR的抑制劑,可通過DNA提取去除。
  • 如果細胞發(fā)生嚴重的支原體污染,448-611bp擴增產(chǎn)物將聚集或270bp的內(nèi)參將消除(見圖,泳道6
  • 低于100bp的低濃度片段,表明是二聚體或非特異性片段,而非陽性結(jié)果,這種情況不影響檢測結(jié)果的精度。

 

檢測結(jié)果示例:

Lane1:大腸桿菌基因組擴增結(jié)果   Lane2:雜交瘤細胞DNA擴增結(jié)果

Lane3:陰性對照(水)           Lane4:陽性對照

Lane5:抑制劑樣本               Lane6:嚴重支原體污染的細胞

Lane7:輕度支原體污染的細胞     Lane8:100bp DNA ladder

 

 

 

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