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多抗和單抗的優(yōu)缺點比較

更新時間:2015-04-22點擊次數(shù):1983

多抗和單抗的優(yōu)缺點比較


來源: 生物耗材網(wǎng)    發(fā)布日期: 2015-4-8  

  

多克隆抗體(多抗)能識別任一抗原上的多個表位,而單克隆抗體(單抗)僅檢測任一抗原上的一個表位(如下圖)。但是多抗單抗兩者有著屬于各自的優(yōu)點和缺點。今天北京博蕾德生物給朋友們說的正是多抗單抗的差異。



多克隆抗體的優(yōu)點:

1. 多克隆抗體可有助于放大低表達水平的靶蛋白信號,因為靶蛋白可在多個表位上結合不止一個抗體分子。但是這會給定量實驗造成不利影響,因為結果將變得不準確

2. 由于能識別多個表位,多克隆抗體可在IP/ChIP中得到更好的結果。

3. 比單克隆抗體更能容許抗原中的微小變化。

4. 它們會識別出與免疫原蛋白質(zhì)具有高同源性的蛋白質(zhì),或者從非免疫原物種的組織樣品中篩選靶蛋白,例如當未測試物種中的抗原性質(zhì)未知時,有時會使用多克隆抗體。這也使得檢測免疫原序列以確定是否有任何交叉反應性非常重要。

5. 多克隆抗體通常是檢測變性蛋白質(zhì)的。

6. 多表位通??商峁└鼮橛辛Φ臋z測。

7. 多克隆抗體不適用于探測抗原的特定結構域,因為抗血清通??勺R別多個結構域。


不足之處:

1·易于產(chǎn)生批次間差異。

2·產(chǎn)生大量非特異性抗體,有時可能在某些應用中產(chǎn)生背景信號。

3·多表位使得檢測免疫原序列以確定是否有任何交叉反應性非常重要。


客觀事實:

1. 識別任一抗原上的多個表位。獲得的血清將包含不同親和力抗體的異質(zhì)復合體混合物。

2. 多克隆抗體主要由 IgG 亞類組成。

3. 肽免疫原通常用于產(chǎn)生靶向*表位的多克隆抗體,特別適合高同源性的蛋白家族。


抗體制備:

1. 制備所需技術和技能不高。

2. 制備時間短。

3. 多克隆抗體不適用于探測抗原的特定結構域,因為多克隆抗血清通常可識別多個結構域。


單克隆抗體優(yōu)點:

1. 雜交瘤制得后,就成為了恒定的再生源,所有批次都將相同–對確保實驗步驟和結果的一致性和標準化非常有幫助。

2. 單克隆抗體通常在切片和細胞染色造成的背景較低。因為它們以更強特異性檢測一個靶表位,所以不太可能與其它蛋白質(zhì)發(fā)生交叉反應。

3. 由于具有特異性,單克隆抗體非常適于用作分析測定中的一抗,或者用于檢測組織中的抗原,并且通常所產(chǎn)生的背景染色顯著低于多克隆抗體。

4. 與多克隆抗體相比,單克隆抗體的同質(zhì)性非常高。如果實驗條件保持不變,單克隆抗體的各實驗結果重現(xiàn)性很高。

5. 單克隆抗體的特異性能使其在混合物中和抗原地結合。


不足之處:

1·可產(chǎn)生大量特異性抗體,但是可能特異性過強。

2·經(jīng)過抗原的化學處理后比多克隆抗體更易于丟失表位。這可通過使用同一抗原的兩個或多個單克隆抗體進行補償。


客觀事實:

1. 僅檢測抗原上的一個表位。

2. 它們僅由一個抗體亞型組成。在需要二抗進行檢測時,應針對正確的亞類選擇抗體。


抗體制備:

1. 需要高技術。

2. 需要先培訓才能使用技術。

3. 制備雜交瘤耗時長。


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