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當(dāng)前位置:首頁(yè)資料下載PLT VASP/P2Y12 流式檢測(cè)試劑盒(中文說明書)

PLT VASP/P2Y12 流式檢測(cè)試劑盒(中文說明書)

發(fā)布時(shí)間:2018/7/17點(diǎn)擊次數(shù):3011

PLT VASP/P2Y12 流式檢測(cè)試劑盒中文說明書

(以英文說明書為準(zhǔn))

產(chǎn)品名稱

貨號(hào)

規(guī)格

應(yīng)用

PLT VASP/P2Y12

7014

10T

利用雙染流式細(xì)胞術(shù),通過VASP的磷酸化作用,測(cè)定P2Y12受體活性。

 

1 簡(jiǎn)介:

血管擴(kuò)張刺激磷蛋白(VASP)是一種重要的細(xì)胞內(nèi)血小板蛋白,基礎(chǔ)狀態(tài)下處于非磷酸化狀態(tài)。其磷酸化,是受cAMP (環(huán)磷酸腺苷) 級(jí)聯(lián)調(diào)節(jié)。前列腺素E1(PGE1)會(huì)激活級(jí)聯(lián)反應(yīng),然而這種級(jí)聯(lián)調(diào)節(jié)通過P2Y12蛋白受體被ADP抑制。

在檢測(cè)時(shí),VASP的磷酸化與P2Y12受體抑制效應(yīng)密切相關(guān),而VASP的非磷酸化狀態(tài)與P2Y12 受體激活相關(guān)。

噻氯匹定和氯吡格雷對(duì)血小板受體的抑制作用是不可逆的。這種效應(yīng)通過PGE1的激活,同時(shí)ADP的加入,而使VASP保持磷酸化,而被證實(shí)。

本試劑盒利用雙色流式細(xì)胞測(cè)定術(shù),通過VASP的磷酸化狀態(tài)的測(cè)定,從而檢測(cè)P2Y12受體活性。

2 方法:

先將全血單獨(dú)與PGE1孵育或與PGE1+ADP混合孵育。細(xì)胞滲透后,處于磷酸化狀態(tài)的VASP通過間接免疫熒光反應(yīng)特異性的被單克隆抗體標(biāo)記。使用雙色流式細(xì)胞分析測(cè)定單獨(dú)PGE1激活的和PGE1聯(lián)合ADP處理管的校準(zhǔn)平均熒光強(qiáng)度(mean fluorescence intensities,MF1),經(jīng)減去空白對(duì)照得到校正后的MFIc,即減去陰性對(duì)照之后的平均熒光強(qiáng)度。再計(jì)算血小板反應(yīng)指數(shù)(Plaet reactivity indexPRI),即VASP磷酸化水平,評(píng)估標(biāo)本中ADP抑制VASP磷酸化的程度。

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