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產(chǎn)品中心

當(dāng)前位置:首頁(yè)產(chǎn)品中心DiacloneELISA Kit人白介素6 ELISA試劑盒

人白介素6 ELISA試劑盒
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

中文名稱人白介素6 ELISA試劑盒
英文名稱Human cytochrome C ELISA ELISA Kit
樣本血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清
檢測(cè)范圍6.25Pg/ml-200Pg/ml
靈敏度2pg/ml
規(guī)格48T/96T/2X96T

產(chǎn)品型號(hào):

更新時(shí)間:2024-12-09

廠商性質(zhì):代理商

訪問(wèn)量:839

服務(wù)熱線

01084640949

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產(chǎn)品介紹

人白介素6 ELISA試劑盒

用途人IL-6 ELISA試劑盒用于體外定量檢測(cè)人血清,血漿,緩沖液或細(xì)胞培養(yǎng)液中的白介素6。此試劑盒只用于科研,不能用于診斷。

檢測(cè)原理:

IL-6試劑盒應(yīng)用的是夾心法固相酶聯(lián)免疫吸附分析法(ELISA)。IL-6特異單克隆抗體被包被于微孔板上,已知IL-6濃度的標(biāo)準(zhǔn)品和未知濃度的樣品可在此反應(yīng)孔中進(jìn)行檢測(cè)。先將IL-6抗原和生物素標(biāo)記IL-6特異單克隆抗體同時(shí)孵育。洗滌后加入親和素過(guò)氧化物酶,孵育后洗去未結(jié)合的酶。其后加入底物,產(chǎn)生顏色反應(yīng),顏色的深淺與樣品中IL-6的濃度成一定的比例關(guān)系。


試劑盒組成及配制:

 

試劑(2-8保存)

1x96孔的配置

產(chǎn)品編號(hào):#950.030.096

 

配制

96T微孔板

1

即用型(已包被)

塑料板蓋

2


標(biāo)準(zhǔn)品:200pg/ml

2

按瓶上的說(shuō)明稀釋(見(jiàn)試劑制備)

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液(Buffer

1瓶(25ml

10x濃度,用純水稀釋。(見(jiàn)試劑制備)

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液液(Human   serum

1瓶(7ml

即用型

對(duì)照

2

按瓶上的說(shuō)明稀釋(見(jiàn)試劑制備)

生物素標(biāo)記IL-6抗體

1(0.4ml)

用生物素標(biāo)記抗體稀釋液稀釋(見(jiàn)試劑制備)

生物素標(biāo)記抗體稀釋液

1(7ml)

即用型

親和素-HRP

2(5ul)

0.5ml HRP稀釋液預(yù)稀釋(見(jiàn)試劑制備,)

HRP稀釋液

1(23ml)

即用型

洗滌緩沖液

1(10ml)

200x,蒸餾水稀釋(見(jiàn)試劑制備)

TMB

1(11ml)

即用型

H2SO4終止液

1(11ml)

即用型

 自備材料:

蒸餾水;加樣器:10ul, 50ul, 100ul, 200ul, 1000ul; 漩渦振蕩器和磁力攪拌器

保存條件:

試劑盒保存于2-8度,

 

樣品收集,處理和保存:

1.       細(xì)胞培養(yǎng)上清:1000xg離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

2.       血清——操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000xg離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

3.       EDTA,檸檬酸鹽和肝素血漿可用于檢測(cè)。1000Xg離心30分鐘去除顆粒。

4.       如果樣品不直接使用,將其分為小部分(250-500ul-70下保存,避免反復(fù)凍融。

如果可能,不要使用溶血和高脂血。如果血清中有大量的顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。

注意:不要在3756加熱解凍。在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍

檢測(cè)程序

使用前,將所有試劑充分混合,不要使液體產(chǎn)生泡沫。根據(jù)樣品數(shù)量加上空白,標(biāo)準(zhǔn)品決定所需的板條,每個(gè)樣品,標(biāo)準(zhǔn)品,空白和質(zhì)控都應(yīng)做雙份。

詳細(xì)步驟

1

制備標(biāo)準(zhǔn)曲線

2

按實(shí)驗(yàn)方案在對(duì)應(yīng)孔加入100ul標(biāo)準(zhǔn)品和樣本,標(biāo)準(zhǔn)品,對(duì)照及空白(選擇合適的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液)所有孔均做復(fù)孔。

3

加入50ul稀釋后的生物素標(biāo)記的IL-6抗體到各孔

4

用塑料膜封板,室溫(18-25)孵育1小時(shí)

5

去掉封板膜,按以下程序洗板:

a.  吸出孔內(nèi)液體。

b.  每孔加入300ul1X的洗滌緩沖液

c.  吸出孔內(nèi)液體

d.  重復(fù)步驟bc兩次

6

加入100ul親和素-HRP溶液到各孔

7

用封板膜,封板,室溫(18-25)孵育30min

8

重復(fù)步驟5

9

加入100ul即用型TMB底物溶液至各孔

10

室溫避光孵育12-15min,用鋁箔包住反應(yīng)板,   避免光照。

11

加入100ul   H2SO4終止液到各孔,終止反應(yīng)。

在分光光度計(jì)中讀取結(jié)果。450nm作為初始波長(zhǎng),620nm作為參考波長(zhǎng)。





更多產(chǎn)品詳情,請(qǐng)聯(lián)系Diaclone 中國(guó)區(qū)總代理北京博蕾德生物科技有限公司。

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