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產(chǎn)品中心

當前位置:首頁產(chǎn)品中心CalBiotechELISA試劑盒25-羥基維生素D ELISA檢測試劑盒

25-羥基維生素D ELISA檢測試劑盒
產(chǎn)品簡介:

Calbiotech 公司是免疫檢測試劑的*。具有30多年的研發(fā)和生產(chǎn)經(jīng)驗,生產(chǎn)超過200多種檢測產(chǎn)品線,客戶群遍布50多個國家。公司提供200余種ELISA 和CLIA試劑盒,涉及檢測領(lǐng)域包括:
甲狀腺、生育、類固醇、糖尿病、過敏原、貧血、生長激素標記物、骨代謝、炎癥檢測、腫瘤、心血管病、藥物檢測、自身免疫及傳染病檢測。Calbiotech竭誠為客戶提供:高品質(zhì)、穩(wěn)定的檢測試劑及產(chǎn)品定制服務(wù)

產(chǎn)品型號:

更新時間:2024-12-09

廠商性質(zhì):代理商

訪問量:778

服務(wù)熱線

01084640949

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產(chǎn)品介紹

25-羥基維生素D檢測試劑盒用于定量檢測人血清中總的25-羥基維生素D含量。

背景簡介:

25-羥基維生素D是激活維持腸內(nèi)鈣吸收和平衡的一類甾類激素。維生素D 有兩個亞型:維生素D2和維生素D3。維生素D2來源于乳制品,而維生素D3在來源日光照射后的皮膚。在肝臟內(nèi)維生素D 25位置發(fā)生羥基化,形成25羥基維生素D。25羥基維生素D是維生素D的主要代謝循環(huán)產(chǎn)物,被廣泛認為是反應(yīng)個體維生素D水平的準確的標記物。多種疾病與維生素缺乏相關(guān):如骨質(zhì)疏松癥、佝僂病、軟骨病、癌癥以及多種心血管疾病。通過飲食補充的維生素D2和維生素D3都在肝臟中轉(zhuǎn)化為25-羥基維生素D。血清或血漿中的25羥基維生素D2D3的總濃度為被認為25羥基維生素D的總量。維生素D缺乏的患者應(yīng)經(jīng)常檢測血清或血漿中的25-羥基維生素D含量,通過補充維生素D使維生素D含量達到*水平,同時避免因過量補充維生素D引起維生素D水平超標。

檢測原理:

試劑盒采用競爭ELSIA 檢測方法。包被有維生素D96孔板與標準品、對照、檢測樣本和生物素標記的維生素D室溫孵育90min。孵育過程中,生物素標記的維生素D與樣品、標準品及質(zhì)控中的維生素D競爭結(jié)合包被的維生素D抗體。洗滌后,通過HRP標記的鏈親合素(SA-HRP)與結(jié)合的生物素標記的維生素D反應(yīng),連檢測維生素D含量。樣本中的維生素D含量越高,生物素標記的維生素D含量越少。未結(jié)合的SA-HRP在被洗掉,加入TMB 室溫孵育30min,有藍色出現(xiàn)。加入終止液,讀取450nm吸光度。用吸光度和和標準品濃度做標準曲線。顏色深淺與25-OH維生素D含量成反比關(guān)系。整個過程為2.5小時。

試劑盒組分

96T

包被有VitaminD抗體的可拆96孔板

12x8x1

即用型標準品(7瓶)

0.5ml

即用型對照(2瓶)

0.5ml

生物素標記的25-OH維生素D1瓶(51X

0.5ml

稀釋液,1

24ml

即用型HRP標記的鏈親合素1

23ml

即用型終止液1

12ml

即用型TMB底物1

24ml

封板膜

2

20X稀釋液1

25ml

樣本收集和處理

血清樣本-通過靜脈采血,血凝集后,盡快分離血清。請不要用溶血的樣本。

新鮮血清可在2-8儲存兩周。長期保存,請在-20一下保存,避免反復凍融。測定前,樣本需置于室溫平衡30min。

試劑制備:

檢測前請?zhí)崆爸苽湟韵略噭?/span>

  1. 標準品和試劑:

血清為即用型,用前請在室溫平衡。

  1. 51X生物素標記:用前稀釋,用稀釋液制備1X工作稀釋液(例如:5ml稀釋液中加入:0.1ml 51X的生物素標記的VitaminD),剩余的稀釋液應(yīng)置于2-8避光,封閉保存。
  2. 制備1X洗滌緩沖液:20X稀釋液(25ml),加入475ml蒸餾水。室溫保存(18-24。)

操作程序:

所有的樣本和檢測試劑在用前都需室溫平衡。

  1. 標準品,對照,樣本加入10ul到對應(yīng)孔。
  2. 加入200 ul 生物素標記的25-OH維生素到各孔。
  3. 振板儀200-400rpm 振板20s,充分混勻。用封板膜封板。
  4. 封板后,室溫孵育90min。
  5. 去掉封板膜。
  6. 倒掉孔內(nèi)液體。
  7. 洗滌:加入300ul1X洗滌緩沖液到各孔,然后倒掉,在吸水紙上拍干。重復洗滌三次。
  8. 加入200ul Streptavdin-HRP到各孔。
  9. 室溫孵育30min。
  10. 倒掉孔內(nèi)液體。
  11. 洗滌:加入300ul1X洗滌緩沖液到各孔,然后倒掉,在吸水紙上拍干。重復洗滌三次。
  12. 用排槍加入:200ul TMB到各孔。
  13. 室溫避光孵育30min。
  14. 終止:加入50ul終止液終止反應(yīng)。輕輕混勻20-30s。
  15. 加入終止液10分鐘內(nèi),讀取450nm吸光度。
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